Il Testo Unico è composto da 306 articoli suddivisi in tredici titoli, a cui si aggiungono 51 allegati tecnici. Conoscerne la struttura permette di orientarsi rapidamente quando un ispettore cita un articolo o quando si deve impostare la valutazione di un rischio specifico.
Il Titolo I contiene i principi comuni, applicabili a tutte le aziende. I titoli dal II all'XI sono dedicati a temi specifici: luoghi di lavoro; uso delle attrezzature e dei dispositivi di protezione individuale, con un capo sugli impianti elettrici; cantieri temporanei o mobili; segnaletica; movimentazione manuale dei carichi; videoterminali; agenti fisici; sostanze pericolose, cioè agenti chimici, cancerogeni e mutageni, amianto; agenti biologici; atmosfere esplosive. È presente anche un titolo X-bis sulla prevenzione delle ferite da taglio e da punta nel settore ospedaliero e sanitario. Il Titolo XII riguarda le disposizioni in materia penale e di procedura penale, il Titolo XIII le norme transitorie e finali.
Gli allegati contengono la parte più tecnica: requisiti dei luoghi di lavoro, requisiti delle attrezzature costruite prima delle direttive di prodotto, contenuti minimi dei piani di sicurezza, segnali, valori limite di esposizione, elenchi di agenti. Molti allegati sono stati modificati nel tempo da decreti successivi. Un consiglio operativo: ogni volta che un titolo speciale rinvia a un allegato, leggerli insieme, perché la regola sostanziale si trova spesso nell'allegato e non nell'articolo.